ELISA检测概述
ELISA酶联免疫试剂盒是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。
产品名称:人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA酶联免疫试剂盒
英文名称:Human Cystatin C, Cys-C Elisa Kit
规格:96T/48T
保存;2-8℃。
检测目的:用于检测血浆,血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属:大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。
自备物品:
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
应用范围:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体(本产品仅供实验室科研及非临床用途)
实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务。注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
11.本公司产品仅用于科研。
操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
;Digoxin 订购|咨询 小鼠苗条受体(Leptin receptor)ELISA试剂盒 英文名: Leptin receptor ELISA Kit 规格: 20mg
大叶茜草;Rubimaillin 订购|咨询 phospho-SYT6(Thr418) 磷化突触蛋白6抗体 规格: 0.1ml 规格: 20mg
大蓟苷;pectolinarin 订购|咨询 MALT1 粘膜相关淋巴组织淋巴瘤转运蛋白1抗体 规格: 0.2ml 规格: 20mg
重楼皂苷II;Chonglou Sapo 订购|咨询 phospho-PKC delta (Tyr311) 磷化蛋白激酶C亚性D型抗体 规格: 0.1ml 规格: 20mg
丙二;Malonic acid 订购|咨询 FNDC2/5 Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白2/5抗体 规格: 0.2ml 规格: 20mg
白果新;Ginkgolic Acid 订购|咨询 小鼠Ⅻ型胶原(COL12)ELISA试剂盒 英文名: COL12 ELISA Kit 规格: 20mg
阿多弗林碱; 订购|咨询 FGF12 成纤维细胞生因子12抗体 规格: 0.2ml 规格: 10mg
克伦特罗;纯品型;标准品-瘦精;有 订购|咨询 Syntaxin 1A(brain) 突触融合蛋白1抗体 规格: 0.1ml 规格: 0.1g
;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP3β)ELISA试剂盒 英文名: MIP3β ELISA Kit 规格: 0.1g
丙炔;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 Fluid A 规格: 0.1g
磺草;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 GAJ/MND1 减数分裂核分裂蛋白1抗体 规格: 0.2ml 规格: 0.1g
四唑;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 Goat Anti-rabbit IgG/HRP 辣根过化物酶标记的羊抗兔IgG 规格: 0.1mlphospho-CTNNBIP1 (Thr43/Ser50) 磷化β链接相互作用蛋白1抗体 规格: 0.1ml 规格: 0.1g
蚜磷;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 大鼠左右决定因子1(LEFTY1)ELISA试剂盒 英文名: LEFTY1 ELISA Kit 规格: 0.1g
;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 小鼠髓分化因子88(MyD88)ELISA试剂盒 英文名: MyD88 ELISA Kit 规格: 0.1g
人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA酶联免疫试剂盒2-溴-4- Tazarotene 质量规格:HPLC法含量测定
2--4- Tazarotene 质量规格 gt;98%,BR
3-(4-)二 Ganoderic acid D 质量规格:HPLC≥98%,标准品
6-烟 Levoceitrizine HCl 质量规格:含量测定
2--N,N-二 Levoceitrizine HCl 质量规格 gt;99%,BR
4-基-3- Cetirizine Hydrochloride 质量规格:含量测定
肉桂 Ramosetron hydrochloride 质量规格:含量测定
N,N-二基羟基 Etodolac 质量规格:含量测定
N,N-二基 Amfebutamone Hydrochloride 质量规格:含量测定
N,N-二基 rosiglitazone hydrochloride 质量规格:HPLC法含量测定
N,N-二 BENZBROMARONE 质量规格:含量测定
环丙 Butenafine HCl 质量规格:HPLC法含量测定
二仲 Tropisetron hydrochloride 质量规格:HPLC>98%,标准品
参皂苷Rc Tropisetron hydrochloride 质量规格 gt;98%,BR
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